所望の配列が得られると、添加された最後のヌクレオチドは3‘-チオヌクレオシドであるべきである。 これは、3‘-チオヌクレオシドを単独で合成し、次いで、標準的なカップリング手順を使用して3’末端に接続することによって達成することができる。
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5'-O-(tert-butyldiphenylsilyl)-3'-S-acetyl-3'-thiothymidine